兔胃黏膜上皮细胞

兔胃黏膜上皮细胞分离培养及鉴定

【简介】

胃黏膜上皮细胞是被覆于胃黏膜表面的单层柱状细胞，在胃黏膜表面排列整齐，顶部细胞质充满黏原颗粒，胃是消化系统的重要器官，胃黏膜上皮细胞直接接触大量来自外界的及内部代谢产生的损伤物，由于许多消化系疾病均与胃黏膜损伤有关，而胃黏膜上皮细胞是保护胃黏膜的最重要屏障，故对胃黏膜上皮细胞的研究尤显重要；

【材料】

3-8周龄兔、手术剪、手术镊、75%酒精、双抗、FBS、培养皿、15ml离心管、DMEM、PBS、D-Hanks；

消化液：MEM(25ml)、 II型胶原酶（0.15%）、胰酶（0.25%）；

【方法】

1）非禁食兔麻醉，打开腹腔，将胃取出，放入冰冷的生理盐水中冲洗胃表面，洗涤胃内容物和黏液；

2）将组织浸泡在预冷含双抗的D-Hanks中5min；

3）将胃组织摊开，浸泡在消化液中，消化15min；

4）搜集细胞悬液，过200目网筛，D-Hanks离心800r/5min,2次；

5）上皮专用培养液种盘，40分钟后，上清换盘培养，利用差速贴壁去除杂细胞；

【培养】

上皮专用培养基

【鉴定】

1）免疫荧光：

阳性：ck18

阴性：vimentin