SD大鼠支气管上皮细胞
大鼠支气管上皮细胞分离自支气管组织；支气管（Bronchi），是指由气管分出的各级分枝，由气管分出的一级支气管，即左、右主支气管。左主支气管与右主支气管相比较，前者较细长，走向倾斜；后者较粗短，走向较前者略直，所以经气管堕入的异物多进入右主支气管。支气管和气管还有以区别就是，气管是以“C”型的气管软骨为支架，而支气管不是。支气管上皮是气道与外界环境接触的第一道防线，不仅是各种病原体、炎症介质作用的靶细胞，还作为效应细胞合成、释放多种炎性介质和细胞因子，从而参与气道炎症及免疫反应。支气管上皮细胞在哮喘、慢性阻塞性肺疾病、肺癌、肺囊性纤维化以及一些感染性呼吸道疾病的发病机制中均起着重要的作用。体外培养的原代支气管上皮细胞因与体内组织在形态结构和功能活动上存在很大的相似性，因此，在基础及临床研究中极为重要。
SD大鼠支气管上皮细胞原代分离培养鉴定
A、无血清完全培养基制备：
1、Ham'sF12培养基；
2、5μg/ml牛垂体提取物；
3、3mg/ml牛血清白蛋白；
4、0.1μg/ml上皮生长因子，
5、50μmol/l磷酸乙醇胺；
6、50μg/ml胰岛素；
7、50μg/ml转铁蛋白；
8、0.3μmol/l氢化可的松（皮肤抗炎症）；
9、2mmol/l的丙酮酸钠（培液自有成分）；
B、上皮专用培液：
DMEM/F12 1:1、15%FBS、EGF 20 ng/ml、bFGF 25ng/ml、肝素钠 10ug/ml；
分离方法：
1、大鼠麻醉后，无菌条件下暴露气管和肺，截取气管组织，保留支气管；
2、环状软骨下方插管，生理盐水灌洗3次，下端在支气管末端处结扎，去除气管表面结缔组织，PBS清洗干净，然后灌入1%链酶蛋白酶，结扎气管分支处，置装有无血清培液的培养皿中保持湿润，4℃过夜（或0.25%胰酶4°消化过夜）；
3、消化时间到后，用F12培养基冲洗支气管，再剪开支气管用细胞刷充分刷洗，收集培养皿中的刷洗液，1000r/5min离心洗涤收集细胞。
4、弃上清后完全培养液重悬37°培养，24h后细胞贴壁换液；
鉴定：
免疫荧光鉴定阳性：角蛋白（CK 18）；
阴性:Vimentin;
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